Une barrière de séparation est une structure physique — mur, barrière ou clôture — édifiée pour empêcher le mouvement de populations à travers une ligne de démarcation, une frontière ou bien pour séparer des groupes humains. Une barrière de séparation qui suit le tracé d'une frontière internationale est appelée une barrière frontalière. La construction de ces barrières est généralement motivée pour limiter l'immigration ou l'émigration illégale, empêcher la contrebande et les trafics, ainsi que pour réduire l'activité de groupes terroristes, d'opposition ou criminels.