Le Championnat de France de volley-ball Pro B 2000-01 oppose douze équipes françaises de volley-ball. Le championnat de France de volley-ball de deuxième division porte le nom de Pro B depuis 1998. Cette saison a été marqué par le forfait général de l'AS Monaco en cours de saison. Harnes Volley-Ball et l'ASUL Lyon Volley-Ball rejoignent la Pro B à l'issue de la saison 1999-2000.