La Taq polymérase (aussi appelée « Taq pol » ou simplement « Taq ») est une enzyme, plus particulièrement une ADN polymérase qui agit dans une certaine gamme de température. Elle a été isolée à partir de la bactérie thermophile Thermus aquaticus en 1969. Sa demi-vie enzymatique à 95°C est de 40 minutes.

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  • La Taq polymérase (aussi appelée « Taq pol » ou simplement « Taq ») est une enzyme, plus particulièrement une ADN polymérase qui agit dans une certaine gamme de température. Elle a été isolée à partir de la bactérie thermophile Thermus aquaticus en 1969. Sa demi-vie enzymatique à 95°C est de 40 minutes. Elle est dépourvue d'activité exonucléasique, ce qui rend donc impossible la correction d'erreur lors de copie.Certains mauvais résultats de la PCR (faux-négatifs) sur certains échantillons d'ADN (notamment provenant de l'urine ou de crachats), pourraient être dus à un inhibiteur de cet enzyme présent dans l'urine, mais non dans le sang.
  • Taq polymeráza je DNA polymeráza I izolovaná z bakterie Thermus aquaticus. Tato bakterie žije v horkých vřídlech a Taq polymeráza je proto přizpůsobená vysokým teplotám – denaturaci odolává mnohem lépe než běžné bakteriální DNA polymerázy. Díky této vlastnosti je Taq polymeráza s výhodou využívána při polymerázové řetězové reakci (PCR), při níž je totiž potřeba opakovaně vystavovat roztok vysokým teplotám dosahujícím 94 °C.
  • Die Taq-Polymerase ist die thermostabile DNA-Polymerase des Bakteriums Thermus aquaticus (Taq). Dieses Bakterium lebt in Geysiren bei etwa 70 °C. Taq-Polymerase ist außerordentlich hitzebeständig und gehört zu den Extremozymen. Die Ursache hierfür liegt im Vorhandensein eines mutierten Kälteschockproteins, welches sich von vergleichbaren Proteinen mesophiler Bakterien durch den Austausch von zwei Aminosäuren unterscheidet. 1969 wurde die Taq-Polymerase erstmals von Thomas Brock und Hudson Freeze isoliert.Das Enzym wird hauptsächlich zur DNA-Vervielfältigung mit Hilfe der Polymerase-Kettenreaktion eingesetzt. DNA-Polymerasen von mesophilen Organismen würden bei Erhitzung während der Polymerase-Kettenreaktion denaturiert und müssten nach jedem Zyklus neu hinzugegeben werden. Bei der DNA-Vervielfältigung mit Taq-Polymerase ist dies nicht notwendig, da das Enzym auch bei hohen Temperaturen noch sehr stabil ist (die Enzym-Halbwertszeit beträgt bei 97,5 °C ca. 9 Minuten). Die DNA-Amplifikation mit Taq ist jedoch fehleranfällig, denn das Enzym besitzt keine proof reading-Funktion. In den amplifizierten DNA-Fragmenten finden sich deshalb Mutationen, die durch ungenaues Kopieren des Matritzenstranges entstehen. Werden sequenzexakte DNA-Amplifikate benötigt, empfiehlt sich daher der Einsatz anderer Polymerasen, etwa von Pfu- oder Pfx- Polymerasen (die ursprünglich ebenfalls aus thermophilen Mikroorganismen isoliert wurden), deren Einsatz jedoch kostenintensiver ist. Bei der Amplifikation eines DNA-Fragments hängt die Taq-Polymerase ein zusätzliches Nukleotid (dATP) an das 3'-Ende des synthetisierten Strangs. Man spricht von einem 3'-A-Überhang (A für Adenin), da sich auf dem Matrizenstrang keine komplementäre Nukleobase (Thymin) befindet. Der 3'-Überhang wird durch das Fehlen der proof reading-Funktion nicht korrigiert und findet Anwendung beim Verfahren der TA-Klonierung.Die Massenproduktion des Enzyms erfolgt durch Übertragung des Gens auf einen Stamm des Bakteriums Escherichia coli. Aus diesen Kulturen wird das Protein gereinigt und in einem glycerolhaltigen Puffer bei −20 °C aufbewahrt.
  • Taq-полимераза, или термостабильная ДНК-полимераза I — термостабильная ДНК-зависимая-ДНК-полимераза бактерии Thermus aquaticus. Taq-полимераза является гомологом ДНК-полимеразы I Escherichia coli. В отличие от E. coli, Th. aquaticus является термофильным микроорганизмом (для его жизнедеятельности оптимальна температура окружающей среды 55 °С и выше), поэтому и его ферменты термостабильны (температурный оптимум составляет 70—80 °С). Taq-полимераза обладает ДНК-полимеразной и 5',3'-экзонуклеазной активностями и применяется для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР).Taq-полимераза была впервые охарактеризована в 1976 году. Этот фермент состоит из 832 аминокислотных остатков и имеет молекулярную массу около 94 кДа.
  • Taq polimeraz, Thermus aquaticus bakterisinden elde edilen DNA polimeraz enzimidir. Thermus aquaticus, termofilik bir bakteridir. Kaplıca ya da jeotermal bölgelerde yaşar. Taq polimeraz enzimi, PCR'da kullanılan, yüksek sıcaklıklara (94 °C) dayanabilen bir enzimdir.
  • La polimerasa Taq es un tipo de ADN polimerasa termoestable, nombrada de esta forma debido a que es producida por la bacteria Thermus aquaticus (T-aq) y a partir de la cual fue aislada en el año 1968 por Thomas D. Brock A menudo suele abreviarse como "Taq Pol" (o simplemente como "Taq"), y es frecuentemente utilizada en las técnicas de PCR, un método que se utiliza para amplificar secuencias cortas de ADN.T. aquaticus es una bacteria que vive en manantiales calientes y fuentes hidrotermales, y la polimerasa Taq que de ella se extrae ha sido caracterizada como una extremoenzima capaz de soportar las condiciones de alta temperatura requeridas durante el proceso de PCR sin desnaturalizarse. Por esta razón ha reemplazado a la ADN polimerasa proveniente de E. coli (Eco pol) que era la que originalmente se utilizaba en esta técnica, pero que requería ser reemplazada luego de cada ciclo de calentamiento aumentando las probabilidades de contaminación y prolongando los tiempos. La temperatura óptima de funcionamiento de la Taq es de 75–80°C, con una semivida mayor a las dos horas a 92,5°C, 40 minutos a 95ºC y 9 minutos a 97,5ºC. Esta enzima puede replicar una cadena de ADN de 1000 pares de bases en menos de 10 segundos funcionando a 72ºC de temperatura.Uno de los inconvenientes de la Taq es su relativamente baja fidelidad. Carece de actividad correctora de errores 5'→3' exonucleasa, y posee una tasa de introducción de errores de aproximadamente 1 cada 9.000 nucleótidos. Sin embargo los dos dominios restantes pueden actuar en coordinación por medio del movimiento acoplado de dominios. Se han aislado algunas otras polimerasas de ADN de otras bacterias termofílicas y arqueas, tales como la polimerasa Pfu (aislada de Pyrococcus furiosus) que sí poseen actividad correctora de errores; estas polimerasas se utilizan solas o combinadas con la Taq cuando se requiere una amplificación de alta fidelidad.La polimerasa Taq produce ADNs que poseen una adenina terminal no apareada colgando de su extremo 3'. Esto puede resultar útil en técnicas de clonación TA, donde un vector de clonación (tal como por ejemplo un plásmido) que posee una timina 3' sobresaliente puede ser utilizado para complementar la adenina sobresaliente del producto de la PCR, permitiendo de esta forma ligar el producto de PCR dentro del vector plásmido.
  • Polimeraza Taq – enzym z grupy polimeraz DNA wyizolowany z bakterii Thermus aquaticus. Wykorzystywana powszechnie w reakcji PCR dzięki swojej stabilności termicznej. Nie wykazuje aktywności 3'-5' egzonukleazy, przez co wprowadza stosunkowo dużo błędów podczas syntezy nowej nici DNA. Dostępne w sprzedaży polimerazy Taq wprowadzają jeden błąd na 10000 nukleotydów. Jest w stanie dokonać replikacji 1000 par zasad w ciągu 30 sekund w temperaturze 72 °C. Po swojej reakcji zostawia na końcach 3' kilka nukleotydów adeninowych. Ta właściwość wykorzystywana jest przy klonowaniu produktów PCR. Do swej aktywności wymaga jonów Mg.
  • La Taq polimerasa ("Taq Pol," o simplement "Taq") és una polimerasa d'ADN (ADN-polimerasa) termoestable emprada en la tècnica de Reacció en cadena per la polimerasa (PCR) per comprovar la presència o absència d'un gen o seqüència de ADN, amplificant un fragment de ADN. Aquest enzim ha reemplaçat en les PCR, l'ADN-polimerasa d'E.coli degut a les condicions de temperatura requerides per aquesta tècnica. Va ser aïllada pe primer cop de l'arqueobacteri hipertermòfil Thermus aquaticus (d'aquí l'abreviatura "Taq"), un bacteri que viu fonts hidrotermals submarines. La Taq va ser identificada com la primera polimerasa capaç de suportar les condicions desnaturalitzats requerides durant la PCR. La seva vida mitja a 95ºC és de 40 min, mantenint-se la seva activitat enzimàtica. Un dels inconvenients de les Taq polimerases és la seva baixa fidelitat replicativa donat que no té activitat 3' - 5' exonucleasa, el mecanisme de correcció de lectura o proofreading que identifica i corretgeix errors en la nova cadena de ADN prenent com a model la cadena motlle. La Taq ADN polimerasa comercial té una taxa d'error d'un de cada 10.000 nucleòtids i produeix típicament, un 16% de productes de PCR d' 1kb (kilobasepair) mutats en la reacció. Pot amplificar una cedena de ADN d' 1kb en aproximadament 30 segons a 72°C. Tot i la taxa d'error, la Taq ADN polimerasa pot ser àmpliament emprada en una gran majoria d'assajos per aquells casos en què no és desitjable aquesta elevada taxa d'error, hi ha Taq polimerases que han estat modificades de tal manera que se'ls ha dotat d'activitat exonucleasa de correcció de lectura. Aquesta activitat 5'-3' exonucleasa en la Taq, ha estat explotada per la PCR quantitativa amb sondes TaqMan o TaqMan real-time PCR, sofisticació de la tècnica clàssica de la PCR, que perment la monitorització de la reacció d'amplificació en tot moment gràcies a l'ús acoblat de sondes fluorescents (TaqMan) i així la determinació de la concentració relativa o absoluta (emprant una patró) de la mostra inicial. Es tracta d'una tèncnica força moderna, molt emprada en estudis d'expressió gènica, on després d'una reacció prèvia de retrotrascripció d'ARNm a ADN, permet la quantificació d'aquest ADN i d'aquesta manera, determinar els nivells d'expressió de l'ARNm d'un gen en concret.La Taq ADN polimerasa proporciona també fragments amb A (Adenines) sobresortints. Això és particularment útil en clonatge TA TA Cloning, a través del qual s'utilitza un vector de clonació (com pot ser un plasmidi) el qual té extrems T (Timina) sobressortints que complementen amb les A sobresortints del producte de la PCR, i així, s'incrementa l'eficiència de la lligació.La Pfu ADN polimerasa (aïllada de Pirococcus furiosus és sovint emprada en comptes de la Taq polimerasa o conjuntament amb ella. Aquest enzim és molt termoestable i té activitat de proofreading del ADN, per tant, és la taxa d'error és molt més baixa.Són diversos els proveidors comercials de Taq ADN Polimerases, incloent Invitrogen, Applied Biosystems, Sigma, Promega, Roche Diagnostics, Qiagen, AttendBio, Bioneer i Fermentas.
  • Taq polymerase /ˌtæk ˈpɒlɨməreɪz/ is a thermostable DNA polymerase named after the thermophilic bacterium Thermus aquaticus from which it was originally isolated by Thomas D. Brock in 1965. It is often abbreviated to "Taq Pol" (or simply "Taq"), and is frequently used in polymerase chain reaction (PCR), a method for greatly amplifying short segments of DNA.T. aquaticus is a bacterium that lives in hot springs and hydrothermal vents, and Taq polymerase was identified as an enzyme able to withstand the protein-denaturing conditions (high temperature) required during PCR. Therefore it replaced the DNA polymerase from E. coli originally used in PCR. Taq's optimum temperature for activity is 75–80°C, with a half-life of greater than 2 hours at 92.5°C, 40 minutes at 95°C and 9 minutes at 97.5°C, and can replicate a 1000 base pair strand of DNA in less than 10 seconds at 72°C.One of Taq's drawbacks is its lack of 3' to 5' exonuclease proofreading activity resulting in relatively low replication fidelity. Originally its error rate was measured at about 1 in 9,000 nucleotides. The remaining two domains act in coordination, via coupled domain motion. Some thermostable DNA polymerases have been isolated from other thermophilic bacteria and archaea, such as Pfu DNA polymerase, possessing a proofreading activity, and are being used instead of (or in combination with) Taq for high-fidelity amplification. Taq makes DNA products that have A (adenine) overhangs at their 3' ends. This may be useful in TA cloning, whereby a cloning vector (such as a plasmid) that has a T (thymine) 3' overhang is used, which complements with the A overhang of the PCR product, thus enabling ligation of the PCR product into the plasmid vector.
  • Taqポリメラーゼとは、好熱菌Thermus aquaticusが産生するDNAポリメラーゼ(EC.2.7.7.7)である。90℃以上の高温でも比較的安定である(DNAポリメラーゼ活性は低下する)ため、PCRに利用されている。ちなみに、この酵素の名前は、産生菌の属名の頭文字と種小名の頭二文字(Thermus aquaticus)に由来する。Taqポリメラーぜは熱水噴出孔に生息しているT. aquaticus から同定されたポリメラーぜである。このポリメラーぜはPCRのような熱を加える実験系に置いても構造が安定であり、変性状態になりにくい。
  • A Taq DNA polimerase, também denominada Taq polimerase ou apenas Taq (EC 2.7.7.7), é uma DNA polimerase termoestável, utilizada na amplificação de fragmentos de DNA através da técnica de PCR. O seu nome é devido a ter sido identificada pela primeira vez na bactéria Thermus aquaticus, uma extremófila encontrada em fontes hidrotermais. A Taq polimerase suporta as elevadas temperaturas usadas em PCR, tendo uma semi-vida enzimática de 40 minutos (a 94°C).A Taq polimerase tem a desvantagem de ter uma fidelidade relativamente baixa, ou seja, ao fabricar trechos de DNA durante o processo de PCR pode incorporar nucleótidos errados. Este fato deve-se à ausência de um mecanismo de proofreading (correcção), que consiste numa atividade 3'-5' exonuclease. Este tipo de atividade enzimática permite a outras polimerases corrigir a introdução de um nucleótido errado na cadeia de DNA nascente. As Taq polimerases usadas comercialmente têm um erro de um nucleótido por cada dez mil.Estas polimerases podem construir uma cadeia de DNA com mil bases (1kb) em cerca de 30 segundos a 72°C. Têm também a característica de acrescentar uma adenina nas extremidades da cadeia produzida, o que permite a utilização deste DNA num tipo de clonagem conhecido como "clonagem TA". Neste, um vetor (por exemplo, um plasmídeo) com timinas salientes é ligado facilmente a esse DNA pois as extremidades são coesivas (a timina emparelha com a adenina em cadeias de DNA).== Referências ==
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  • La Taq polymérase (aussi appelée « Taq pol » ou simplement « Taq ») est une enzyme, plus particulièrement une ADN polymérase qui agit dans une certaine gamme de température. Elle a été isolée à partir de la bactérie thermophile Thermus aquaticus en 1969. Sa demi-vie enzymatique à 95°C est de 40 minutes.
  • Taq polymeráza je DNA polymeráza I izolovaná z bakterie Thermus aquaticus. Tato bakterie žije v horkých vřídlech a Taq polymeráza je proto přizpůsobená vysokým teplotám – denaturaci odolává mnohem lépe než běžné bakteriální DNA polymerázy. Díky této vlastnosti je Taq polymeráza s výhodou využívána při polymerázové řetězové reakci (PCR), při níž je totiž potřeba opakovaně vystavovat roztok vysokým teplotám dosahujícím 94 °C.
  • Taq polimeraz, Thermus aquaticus bakterisinden elde edilen DNA polimeraz enzimidir. Thermus aquaticus, termofilik bir bakteridir. Kaplıca ya da jeotermal bölgelerde yaşar. Taq polimeraz enzimi, PCR'da kullanılan, yüksek sıcaklıklara (94 °C) dayanabilen bir enzimdir.
  • Taqポリメラーゼとは、好熱菌Thermus aquaticusが産生するDNAポリメラーゼ(EC.2.7.7.7)である。90℃以上の高温でも比較的安定である(DNAポリメラーゼ活性は低下する)ため、PCRに利用されている。ちなみに、この酵素の名前は、産生菌の属名の頭文字と種小名の頭二文字(Thermus aquaticus)に由来する。Taqポリメラーぜは熱水噴出孔に生息しているT. aquaticus から同定されたポリメラーぜである。このポリメラーぜはPCRのような熱を加える実験系に置いても構造が安定であり、変性状態になりにくい。
  • La Taq polimerasa ("Taq Pol," o simplement "Taq") és una polimerasa d'ADN (ADN-polimerasa) termoestable emprada en la tècnica de Reacció en cadena per la polimerasa (PCR) per comprovar la presència o absència d'un gen o seqüència de ADN, amplificant un fragment de ADN. Aquest enzim ha reemplaçat en les PCR, l'ADN-polimerasa d'E.coli degut a les condicions de temperatura requerides per aquesta tècnica.
  • Die Taq-Polymerase ist die thermostabile DNA-Polymerase des Bakteriums Thermus aquaticus (Taq). Dieses Bakterium lebt in Geysiren bei etwa 70 °C. Taq-Polymerase ist außerordentlich hitzebeständig und gehört zu den Extremozymen. Die Ursache hierfür liegt im Vorhandensein eines mutierten Kälteschockproteins, welches sich von vergleichbaren Proteinen mesophiler Bakterien durch den Austausch von zwei Aminosäuren unterscheidet.
  • Taq polymerase /ˌtæk ˈpɒlɨməreɪz/ is a thermostable DNA polymerase named after the thermophilic bacterium Thermus aquaticus from which it was originally isolated by Thomas D. Brock in 1965. It is often abbreviated to "Taq Pol" (or simply "Taq"), and is frequently used in polymerase chain reaction (PCR), a method for greatly amplifying short segments of DNA.T.
  • La polimerasa Taq es un tipo de ADN polimerasa termoestable, nombrada de esta forma debido a que es producida por la bacteria Thermus aquaticus (T-aq) y a partir de la cual fue aislada en el año 1968 por Thomas D. Brock A menudo suele abreviarse como "Taq Pol" (o simplemente como "Taq"), y es frecuentemente utilizada en las técnicas de PCR, un método que se utiliza para amplificar secuencias cortas de ADN.T.
  • Taq-полимераза, или термостабильная ДНК-полимераза I — термостабильная ДНК-зависимая-ДНК-полимераза бактерии Thermus aquaticus. Taq-полимераза является гомологом ДНК-полимеразы I Escherichia coli. В отличие от E. coli, Th. aquaticus является термофильным микроорганизмом (для его жизнедеятельности оптимальна температура окружающей среды 55 °С и выше), поэтому и его ферменты термостабильны (температурный оптимум составляет 70—80 °С).
  • Polimeraza Taq – enzym z grupy polimeraz DNA wyizolowany z bakterii Thermus aquaticus. Wykorzystywana powszechnie w reakcji PCR dzięki swojej stabilności termicznej. Nie wykazuje aktywności 3'-5' egzonukleazy, przez co wprowadza stosunkowo dużo błędów podczas syntezy nowej nici DNA. Dostępne w sprzedaży polimerazy Taq wprowadzają jeden błąd na 10000 nukleotydów. Jest w stanie dokonać replikacji 1000 par zasad w ciągu 30 sekund w temperaturze 72 °C.
  • A Taq DNA polimerase, também denominada Taq polimerase ou apenas Taq (EC 2.7.7.7), é uma DNA polimerase termoestável, utilizada na amplificação de fragmentos de DNA através da técnica de PCR. O seu nome é devido a ter sido identificada pela primeira vez na bactéria Thermus aquaticus, uma extremófila encontrada em fontes hidrotermais.
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