La coupe de Tunisie de football 2000-2001 est la 45e édition de la coupe de Tunisie, la 70e depuis 1923. C'est une compétition à élimination directe mettant aux prises des centaines de clubs de football amateurs et professionnels à travers la Tunisie. Elle est organisée par la Fédération tunisienne de football et ses ligues régionales.