L'ADN polymérase Pfu, souvent appelée Pfu polymérase par anglicisme, est l'ADN polymérase de Pyrococcus furiosus, une archée hyperthermophile.

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  • L'ADN polymérase Pfu, souvent appelée Pfu polymérase par anglicisme, est l'ADN polymérase de Pyrococcus furiosus, une archée hyperthermophile. En tant qu'ADN polymérase, cette nucléotidyltransférase a pour fonction de répliquer l'ADN au cours de la division cellulaire.La Pfu polymérase est utilisée au laboratoire pour l'amplification PCR de l'ADN, fonction pour laquelle elle présente plusieurs avantages par rapport à la Taq polymérase de Thermus aquaticus, une bactérie thermophile : elle est thermiquement plus stable, et surtout elle possède une activité exonucléase 3' vers 5' permettant d'éliminer les erreurs d'insertion de bases nucléiques au cours de la réplication, de sorte que la PCR par Pfu polymérase est plus fiable que celle réalisée à l'aide de la Taq polymérase. La Pfu polymérase disponible commercialement génère un taux d'erreur de 1 pour 1,3 million de paires de bases et peut produire environ 2,6 % d'ADN muté lorsqu'elle est utilisée en PCR. Elle est cependant plus lente que la Taq polymérase, requérant typiquement une à deux minutes par cycle pour amplifier 1 kb d'ADN à 72 °C.
  • Die Pfu-Polymerase ist ein Enzym aus dem thermophilen Archaebakterium Pyrococcus furiosus. Es ist eine thermostabile DNA-Polymerase mit einer Korrekturlese (engl. proof-reading)-Funktion, die in der biochemischen Laborarbeit bei der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) verwendet wird.Die Pfu-Polymerase bricht bei Erreichen von fehlerhaftem Uracil in der DNA die Kettenverlängerung ab und sorgt durch diese read ahead-Funktion dafür, dass weniger fehlerhafte DNA-Klone synthetisiert werden. Die Pfu kommt in der Molekularbiologie hauptsächlich bei denjenigen PCR-Reaktionen zum Einsatz, die sequenzexakte DNA-Amplifikate liefern müssen. Für die übrigen PCR-Operationen ist die wesentlich günstigere und schnellere, dafür weniger akkurate Taq-Polymerase meist ausreichend. Die Pfu hat zudem gegenüber der Taq den Vorteil, dass sie glatte Enden sog. blunt-ends produziert und keine 3′-Überhänge aus Adenosylresten anfügt. Die synthetisierten PCR-Produkte zeichnen sich durch glatte Enden aus, was für das Klonieren von Vorteil sein kann.
  • Pfu DNA polimerase merupakan salah satu jenis enzim yang digunakan dalam reaksi PCR (polymerase chain reaction). PCR ini banyak digunakan dalam berbagai penelitian dibidang molekuler untuk memperbanyak sekuen DNA. Enzim Pfu DNA polimerase mampu memperpanjang rantai DNA dalam suatu siklus. Sumber utama enzim ini adalah Pyrococcus furiosus. Keunggulan utamanya dibandingkan dengan enzim DNA polimerase lainnya ialah waktu paruhnya yang sangat lama dan adanya mekanisme perbaikan rantai DNA yang salah (proofreading). Selain itu, enzim ini bersifat termostabil atau bersifat tahan suhu tinggi.Mekanisme proofreading-nya adalah 3'-5' eksonuklease. Melalui mekanisme proofreading, suatu kesalahan penambahan basa DNA saat amplifikasi dapat diperbaiki. Aktivitas proofreading ini memiliki keakuratan yang sangat tinggi sehingga enzim ini sering kali digunakan dalam reaksi pemanjangan primer, kloning, dan amplifikasi rantai DNA ujung tumpul (blunt end).
  • Pfu DNA polymerase is an enzyme found in the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus furiosus, where it functions to copy the organism's DNA during cell division. In the laboratory setting, Pfu is used to amplify DNA in the polymerase chain reaction (PCR), where the enzyme serves the central function of copying a new strand of DNA during each extension step.
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  • L'ADN polymérase Pfu, souvent appelée Pfu polymérase par anglicisme, est l'ADN polymérase de Pyrococcus furiosus, une archée hyperthermophile.
  • Pfu DNA polymerase is an enzyme found in the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus furiosus, where it functions to copy the organism's DNA during cell division. In the laboratory setting, Pfu is used to amplify DNA in the polymerase chain reaction (PCR), where the enzyme serves the central function of copying a new strand of DNA during each extension step.
  • Die Pfu-Polymerase ist ein Enzym aus dem thermophilen Archaebakterium Pyrococcus furiosus. Es ist eine thermostabile DNA-Polymerase mit einer Korrekturlese (engl. proof-reading)-Funktion, die in der biochemischen Laborarbeit bei der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) verwendet wird.Die Pfu-Polymerase bricht bei Erreichen von fehlerhaftem Uracil in der DNA die Kettenverlängerung ab und sorgt durch diese read ahead-Funktion dafür, dass weniger fehlerhafte DNA-Klone synthetisiert werden.
  • Pfu DNA polimerase merupakan salah satu jenis enzim yang digunakan dalam reaksi PCR (polymerase chain reaction). PCR ini banyak digunakan dalam berbagai penelitian dibidang molekuler untuk memperbanyak sekuen DNA. Enzim Pfu DNA polimerase mampu memperpanjang rantai DNA dalam suatu siklus. Sumber utama enzim ini adalah Pyrococcus furiosus.
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